Elabscience總鐵結(jié)合力(TIBC)色法測(cè)試盒適用于檢測(cè)血清樣本中總鐵結(jié)合力。血清內(nèi)加入過(guò)量鐵,使血清中運(yùn)鐵蛋白全部與鐵結(jié)合,再加入鐵吸附劑將多余的鐵吸附掉,然后在酸性溶液和還原劑的作用下,使運(yùn)鐵蛋白中鐵與蛋白分離,使血清中高鐵還原成亞鐵,后者與雙吡啶結(jié)合成粉紅色絡(luò)合物,在一定范圍內(nèi),鐵離子多少與色澤呈正相關(guān),測(cè)得的鐵含量為T(mén)IBC,由TIBC減去血清鐵值,則稱為未飽和鐵結(jié)合力(UIBC)。
實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵點(diǎn)
① 沸水浴后離心,上清液必須澄清。
② 實(shí)驗(yàn)器具一定要洗干凈,避免鐵離子污染。
③ 粉劑比較難溶解,需提前配制。
操作步驟
標(biāo)曲部分
① 標(biāo)準(zhǔn)孔:取 30 μL 不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品,加入到對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)孔中。
② 向①中各孔加入 150 μL 鐵顯色劑。
③ 在酶標(biāo)儀上振板 5 s,覆膜室溫靜置 5 min,酶標(biāo)儀 520 nm 處,測(cè)定
各孔 OD 值。
樣本部分
待測(cè)樣本上清的制備:取 50μL血清,加入50μL的 10 mg/L 鐵標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用液,渦旋混勻3s,室溫靜置5 min,再加入一支試劑五,渦旋混勻3 s,室溫靜置5 min 后,3000×g,離心10 min,取上清待測(cè)。
① 測(cè)定管:取 50μL待測(cè)樣本上清到1.5 mL EP 管中。
對(duì)照管:取 50μL雙蒸水到1.5 mL EP 管中。
② 向①中各管加入250μL 鐵顯色劑,渦旋混勻3 s,沸水浴5 min。
③ 流水冷卻,10000×g,離心10 min。(若上清渾濁,取渾濁上清于新EP管中,再離心一次)
④ 取 180μL上清到板孔中,酶標(biāo)儀520 nm處,測(cè)定各孔OD值。
產(chǎn)品選購(gòu):
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
E-BC-K071-M | 總鐵結(jié)合力(TIBC)比色法測(cè)試盒 | 48T(31 samples) |
96T(79 samples) |