試劑盒樣本選擇
試劑盒說明書中的參考值涉及不同的年齡分布,應(yīng)怎樣進(jìn)行臨床試驗(yàn)樣本選擇?
臨床試驗(yàn)設(shè)計(jì)過程中,納入病例數(shù)除關(guān)注總體病例數(shù)、陽性和陰性病例數(shù)分布、干擾病例外,還應(yīng)關(guān)注必要的病例分組、分層的需求。如試劑盒參考值在不同年齡段人群中有不同區(qū)間,在病例納入時,應(yīng)考慮不同年齡段人群的差異,分別納入有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義數(shù)量的不同年齡段人群,每個分段的人群中陽性和陰性病例比例應(yīng)均衡。如參考值年齡分段較多,按照上述要求入組的總體病例數(shù)可能高于《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》規(guī)定的低樣本量的要求。
完整的ELISA試劑盒包含以下各組分:
(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);
(3)酶的底物;
(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測定中);
(5)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;
(6)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
(7)酶反應(yīng)終止液,常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的終體積而異,在板式ELISA中一般采用3mol/L。